肝功能检查必须空腹，空腹时间一般为8-12小时，对于初次检查肝功能者，尤应如此。
肝功能检查前一晚最好不要吃太油腻、太辛辣的食物，此类食物可使血脂试验明显增加，因此需在抽血前10小时内禁止食用含脂肪类多的食物为佳。检查前一天宜进食一些清淡的食物；最好不要吃含有丰富胡萝卜素、叶黄素的食物，因为可能会使血清呈黄色，影响黄疸指数测定结果。
肝功能检查只是诊断肝胆系统疾病的一种辅助手段，如检查结果异常，还必须结合血液检查、肝脏超声检查、腹部CT等辅助检查，进一步明确诊断。此外如检查结果仅显示γ-谷氨酰转肽酶浓度增高，未发现其他异常，通常可能是饮酒所致，应禁酒2~3周后再复查，确认γ-谷氨酰转肽酶浓度是否恢复正常。

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